Citrin deficiency

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20301360

Citrin deficiency can manifest in newborns as neonatal intrahepatic cholestasis caused by citrin deficiency (NICCD), in older children as failure to thrive and dyslipidemia caused by citrin deficiency (FTTDCD), and in adults as recurrent hyperammonemia with neuropsychiatric symptoms in citrullinemia type II (CTLN2). 

Critical intermediates

pHAES-WCB (Starting material) -> pHAES10 -> EB96 -> HAES

1.Propagation with MEF in KSR.

2.Period of EB formation

A.4 days in XF(-) in 96-well dishes.

3.Period of adhesion.

A.28 to 35 days in XF32.

Critical intermediate

Critical parameter

Critical procedure

pHAES-WCB (Starting material) -> pHAES10 -> EB96 -> HAES

Sampling

pHAES10: 10-cm dish cultivation just before EB formation

EB96: EBs just before passage into T25 flasks.

最終製品特性解析確認表

	各Lot. （Lot. No.＠）
疾患マウスへの投与日	14/@ /@
製造日	14/@/@
アンモニア代謝	n=3 wells
形態	写真　位相差　X4 (2枚）、X10 (4枚）、X20 (4枚）
RT-PCR	n=1, 3 wells pooled, Isongen, -80℃保存
免染	pellet, n=1, 3 wells pooled, 4%PFA
生細胞数	トリパンブルー、カウンテス、n=3 wells
工程由来不純物	インスリン: 細胞洗浄液、-20℃、　　BSA: 細胞pellet、-20℃、全wells
LIN28	n=1, 3 wells pooled,RLT buffer, -80℃保存
ミトコンドリア量	無し
グルタミン合成酵素	無し
フローサイトメトリー	無し、免染で代替
院内製剤
粒度	カウンテス
生存細胞率	カウンテス
工程由来不純物	collagenase

Determination of critical quality attributes (CQA) of the final product and critical intermediates

in Japanese

Morphology under phase contrast microscopy

Morphology by cell pellet (HE, PAS, immunocytochemistry by the yellow antibodies)

Viability by Countes after trypan blue stain.

qRT-PCR (Alb, AFP, OTC, CPS1)

Implantation into the subcapsular tissue of the kidney

Ammonia metabolism in vitro

Ammonia metabolism in vivo

Morphology by cell pellet (Oil Red O)

ICG test

qRT-PCR (Cyp 1A2, 2B6, 3A4)

Genomics

Will not do:

Flow cytometry

Antibodies

腫瘍マーカー

        CEA

CA125

CA19-9

c-kit

上皮系

        EMA

        E-cadherin

keratin

CKAE1/AE3

CK7

a-SMA

筋系

        Desmin

Myoglobin

HHF35

間葉系

        Vimentin

神経系

        GFAP

NSE

S-100

血管、リンパ管系

        CD31

CD34

白血球系

        LCA

CyclinD1

内分泌系

        HGM-45M1

MUC-5AC

Insulin

Glucagon

Somatostatin

hCG

肝ALB

AFP

HepPer1

増殖細胞、細胞周期

        ki-67

PCNA

未分化マーカー

        Oct3/4

その他

        CDX2

細胞加工製品の品質管理、安全性確保の事項にＩＣＨガイドライン（Q5A, Q5D, Q5E, Q6B, S6）

http://mtpro.medical-tribune.co.jp/mtnews/2015/M48190201/

ID: yahoo

Password: Usual 8 letters

http://www.pmda.go.jp/operations/shonin/info/saisei-iryou/pdf/IABS_sympo2015_gaiyou.pdf

上のサイトからコピペ。

　ICHガイドラインで再生医療に用いられる細胞・組織加工製品に適用が可能なものは，品質に関するガイドライン（ICH-Q）のICH-Q5（生物薬品の品質，Q5A〜Q5E，表1）のうち，Q5A「ヒトまたは動物細胞株を用いて製造されるバイオテクノロジー応用医薬品のウイルス安全性評価」，Q5D「生物薬品（バイオテクノロジー応用医薬品／生物起源由来医薬品）製造用細胞基剤の由来，調製および特性解析」，Q5E「生物薬品（バイオテクノロジー応用医薬品／生物起源由来医薬品）の製造工程の変更に伴う同等性／同質性評価」，ICH-Q6（規格および試験方法，Q6AとQ6B，表2）のQ6B「生物薬品（バイオテクノロジー応用医薬品／生物起源由来医薬品）の規格および試験方法の設定」，安全性，非臨床に関するガイドライン（ICH-S）のうちICH-S6（バイオテクノロジー応用医薬品）の「バイオテクノロジー応用医薬品の非臨床における安全性評価」の5シリーズである。一方，同ガイドラインを適用しにくい事項については，その対応が課題となる。

細胞加工製品の品質管理、安全性確保の多くの事項に対しても、ＩＣＨガイドライン（Q5A, Q5D, Q5E, Q6B, S6）の考え方が適用可能かつ有用であること、また、ガイドラインを当てはめにくい特有の事項への対応が今後の課題とされました。そのような課題に対して、細胞加工製品の種類、対象患者、製造管理などの複雑な環境の中で規制において柔軟にリスクベースでの対応を行いながら、ＷＨＯその他の場を通じて、引き続き、国際的なコンセンサスを得ていく必要性が確認されました。 

http://www.pmda.go.jp/ich/ich_index.html

Q5A: ウィルス安全性評価

Q5D: Bank

Q5E: 同等性・同質性

Q6B: 規格及び試験方法　（特性解析試験方法　CQA. SPECIFICATIONS: TEST PROCEDURES AND ACCEPTANCE CRITERIAFOR BIOTECHNOLOGICAL/BIOLOGICAL PRODUCTS）

S6: 生物製剤の非臨床安全性評価

規格：Specification

特性解析: Characterization

Biologics License Application (BLA)

FDAのサイトからコピペ。NDAって言わないんだ。

Biologics License Applications (BLA) Process (CBER)

The Biologics License Application (BLA) is a request for permission to introduce, or deliver for introduction, a biologic product into interstate commerce (21 CFR 601.2). The BLA is regulated under 21 CFR 600 – 680.  A BLA is submitted by any legal person or entity who is engaged in manufacture or an applicant for a license who takes responsibility for compliance with product and establishment standards.  Form 356h specifies the requirements for a BLA. This includes:

• Applicant information
• Product/Manufacturing information
• Pre-clinical studies
• Clinical studies
• Labeling