Implantation of Kiy-Hep cells
Cell
1.Hep2044 (Yu)---Tendon or myocytes, but no hepatocytes.
2.Hep2020---will be sacrified on Nov 22.
3.Hep2004---No phenotypes (no hepatocytes) by four replicates or injection.
4.Hep2013 (Yu)---will be sacrified on Nov 22.
5.Hep2017---will be sacrified on Nov 22.
6.Hep2018---injection done.
7.Hep2040---injection done.
8. Hep2045---injection done.
9. Hep2022D---injection done.
10.Hep2023D---injection done.
11.Hep2039D---injection done.
Experiment
1. Implantation of the cells into subcapsular region.
2. Myocytic differentiation
3. Possibly tendon-like morphology
Plan:
1. Gene chip analysis of Kiy-Hep cells
2. Immunohistochemistry
A. Desmin
B. Myoglobin
C. Tendon-related molecules
D. Vimentin
F. Myosin
G. gamma-actin
3. Deposition of the cells to NIHS
4. Review of papers from Cui (myocyte), Asahara lab and Hiraki lab (tendon).
5.Integration of the transgenes, e.g. TERT.
6.qRT-PCR
7.Phase contrast photomicrograph.
8.Cell information from Tohru.
9. Injection of the cells into dmd mice.
10.Karyotype.
11.Flowcytometry.
12.Myogenic differentiation and tendon differentiation in vitro.
13.Immunohistochemistry.
14.Subcutaneous implantation of a large number of the cells.
| 肝細胞名 | 状態 | 細胞数(×10e6) | Passage | チューブ本数 | 年齢 | 性別 | 疾患名等 | 肝臓重量 | 分離方法 |
| Hep2004 | Rec-Hepatocyte | 6.0 | P1 | 4 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | Collagenase灌流 | |||
| Hep2004 | Rec-Mix | 14.2 | P1 | 4 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | Collagenase灌流 | |||
| Hep2005 | Rec-PPT | 11.0 | P2PD5 | 2 | ７か月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | Collagenase灌流 | |
| Hep2006 | Rec-PPT | 3.5 | P1PD1 | 1 | 2歳8ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | Collagenase灌流 | |
| Hep2006 | Rec-SUP | 5.4 | P1PD1 | 1 | 2歳8ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | Collagenase灌流 | |
| Hep2007 | Rec-SUP | 1.3 | P1PD2 | 2 | 1歳1ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全肝重量296g。肝断片重量76g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2009 | Rec-PPT | 10.0 | P1PD2 | 1 | 5ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症 | 全体199g、検体26g | Collagenase灌流 |
| Hep2009 | Rec-SUP | 3.5 | P1PD2 | 1 | 5ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症 | 全体199g、検体26g | Collagenase灌流 |
| Hep2009 | Don-SUP | 4.7 | P1PD1 | 1 | 31歳 | 男 | 84g+54g（84gを分離、54gは凍結） | Collagenase灌流 | |
| Hep2012 | Rec-SUP2 | 2.4 | Fresh | 1 | 8ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | Collagenase灌流 | |
| Hep2013 | Rec-PPT | 5.0 | Fresh | 1 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2013 | Rec-SUP1 | 3.2 | Fresh | 1 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2013 | Rec-SUP2 | 2.3 | Fresh | 1 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2013 | Rec-SUP3 | 6.2 | Fresh | 2 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2014 | Rec-PPT | 2.2 | Fresh | 1 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2014 | Rec-SUP1 | 9.7 | Fresh | 2 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2014 | Rec-SUP2 | 2.6 | Fresh | 1 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2014 | Rec-SUP3 | 4.0 | Fresh | 1 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2015 | Rec-SUP2 | 25.0 | Fresh | 1 | 1歳1ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全393g 内 63g使用 | Collagenase灌流 |
| Hep2015 | Rec-SUP3 | 11.0 | Fresh | 1 | 1歳1ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全393g 内 63g使用 | Collagenase灌流 |
| Hep2015 | Don-SUP3 | 20.0 | Fresh | 1 | 40歳 | 男 | |||
| Hep2017 | Rec-SUP1 | 31.0 | Fresh | 1 | 1歳3ヶ月 | 女 | 糖原病Ib型に対する生体肝移植 | 全肝重量 828g。肝断片重量 記載漏れ | Collagenase灌流。硬変少し。かなり重度な脂肪肝。ガーゼで１回ろ過。Clude細胞液50mLをもらった。 |
| Hep2017 | Rec-SUP2 | 31.0 | Fresh | 1 | 1歳3ヶ月 | 女 | 糖原病Ib型に対する生体肝移植 | 全肝重量 828g。肝断片重量 記載漏れ | Collagenase灌流。硬変少し。かなり重度な脂肪肝。ガーゼで１回ろ過。Clude細胞液50mLをもらった。 |
| Hep2018 | Rec-SUP2+SUP3 | 2.2 | Fresh | 1 | 4歳 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全肝重量 450g。肝断片（左葉）重量 26g。 | Collagenase灌流。ガーゼで１回ろ過。Clude細胞液45mLをもらった。ビリルビンの蓄積はない。見た目は正常な色だが、繊維化が進行していた。実質細胞が採取しづらい |
| Hep2020 | Rec-SUP1 | 76.0 | Fresh | 2 | 6歳 | 男 | 先天性肝線維症に対する生体肝移植 | 全肝重量 804g、検体111g | Collagenase灌流。ガーゼで１回ろ過。メッシュで１回ろ過。Clude細胞液65mLをもらった。繊維化が進行していたため組織が硬かったが、コラゲナーゼ処理後、組織はかなり柔らかくなった。 |
| Hep2022 | Don-SUP2 | 29.0 | Fresh | 1 | 26歳 | 男 | 67.5g | Collagenase灌流。ガーゼで１回ろ過。Clude細胞液約100mLをもらった。 | |
| Hep2022 | Don-SUP3 | 4.5 | Fresh | 1 | 26歳 | 男 | 67.5g | Collagenase灌流。ガーゼで１回ろ過。Clude細胞液約100mLをもらった。 | |
| Hep2023 | Don-SUP1 | 73.0 | Fresh | 1 | 32歳 | 男 | Collagenase灌流.正常肝組織 白色脂肪が多い。全体的に白濁。黄色い脂肪はない。予想外に細胞が得られなかった。１回目の遠心でDNA塊のようなドローっとしたものが沈殿したので、沈殿塊を除去した細胞懸濁液を再度４０um穴セルストレーナーでろ過してから使用した。 | ||
| Hep2039 | Don-SUP1 | 45.0 | Fresh | 1 | 36歳 | 女 | 胆道閉鎖症（BA）に対する生体肝移植。ドナー肝。 | Collagenase灌流 | |
| Hep1039 | Don-SUP2 | 11.5 | Fresh | 1 | 36歳 | 女 | 胆道閉鎖症（BA）に対する生体肝移植。ドナー肝。 | Collagenase灌流 | |
| Hep2040 | Rec-SUP1 | 100.0 | Fresh | 4 | 7ヶ月 | 男 | 肝内胆汁うっ滞症（アラジール症候群疑い）に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 | 全肝重量489g、肝断片重量70ｇ。 | Collagenase灌流 |
| Hep2040 | Rec-SUP2 | 41.0 | Fresh | 2 | 7ヶ月 | 男 | 肝内胆汁うっ滞症（アラジール症候群疑い）に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 | 全肝重量489g、肝断片重量70ｇ。 | Collagenase灌流 |
| Hep2040 | Rec-SUP3 | 17.0 | Fresh | 1 | 7ヶ月 | 男 | 肝内胆汁うっ滞症（アラジール症候群疑い）に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 | 全肝重量489g、肝断片重量70ｇ。 | Collagenase灌流 |
| Hep2041 | Rec-PPT | 0.3 | Fresh | 1 | 2歳7ヶ月 | 女 | MMA（メチルマロン酸血症）に対する生体肝移植 | 全肝重量1412g、検体断片重量94g | Collagenase灌流 |
| Hep2044 | Rec-PPT | 12.0 | Fresh | 4 | 5ヶ月 | 女 | 原因不明肝硬変（胆道閉鎖症の疑い強い、病理診断にて確定の見込み） | 全肝重量314ｇ、肝断片重量41ｇ。 | Collagenase灌流 |
| Hep2045 | Rec-SUP1 | 64.0 | Fresh | 2 | 15歳 | 男 | 胆道閉鎖症（BA）に対する生体肝移植 | 全肝重量 964g、肝断片重量 141g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2045 | Rec-SUP2+3 | 13.7 | Fresh | 1 | 15歳 | 男 | 胆道閉鎖症（BA）に対する生体肝移植 | 全肝重量 964g、肝断片重量 141g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2045 | Rec-PPT | 0.1 | Fresh | 1 | 15歳 | 男 | 胆道閉鎖症（BA）に対する生体肝移植 | 全肝重量 964g、肝断片重量 141g。 | Collagenase灌流 |
| 肝臓はコラゲナーゼ酵素処理後低速遠心分離してPPT(pellette)とSUP(supernatant)に分けて凍結保存しました。 | |||||||||
| 生体肝移植時のレシピエント肝をRec、ドナー肝をDonとしてチューブに表記しています。よってHep2009とHep2015に関しましてはドナー細胞とレシピエント細胞の２種類存在します。 | |||||||||
